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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse IL-4 protein (Animal-Free)

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠白介素-4（無動(dòng)物源）（IL-4）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100μg

貨號(hào)：EY-01X8623
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽:無標(biāo)簽

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來源于：鼠源 IL-4（P07750）（Met 1-Ser140）表達(dá)的蛋白片段，C端融合有多聚標(biāo)簽。

蛋白長(zhǎng)度：重組小鼠IL-4由118個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為13.3 kDa。 在還原性條件下的SDS-PAGE中，重組小鼠IL-4的分子量約為15-19 kDa。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

采用 LAL 法檢測(cè)，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于 0.1。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的PBS。

基因ID:16189

使動(dòng)?動(dòng)

背景

白細(xì)胞介素4（IL-4）是一種多效性細(xì)胞因子，主要由活化的T淋巴細(xì)胞，嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞產(chǎn)生。它是一種糖基化多肽，包含三個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵，并具有一個(gè)成束的四個(gè)α-螺旋結(jié)構(gòu)，除了在介導(dǎo)炎癥性過敏反應(yīng)中中發(fā)揮作用外，在腫瘤和自身免疫性疾病的治療和研究中也起著重要作用。小鼠的IL-4由24個(gè)aa信號(hào)序列:合成。IL-4對(duì)多種細(xì)胞具有多種免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)功能，在調(diào)節(jié)同種型轉(zhuǎn)換、誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IgE、誘導(dǎo)前體T輔助細(xì)胞分化等方面具有重要作用。IL-4可與膜結(jié)合型以及分泌型可溶性IL-4受體結(jié)合。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原

HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白

EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白

GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 大鼠3(VD3)檢測(cè)試劑盒

Humahyroid-Peroxidase,TPOELISAKit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancoloncancer-specificaigen-4,CCSA-4檢測(cè)試劑盒人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織AURORA-A激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

humanpyridoxal/pyridoxinevitaminB6-phosphatase,PDXPELISAKit人哆/哆醇B60酸酶(PDXP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔環(huán)0酸鳥苷(rabbit cGMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔C反應(yīng)蛋白(rabbit CRP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(rabbit COMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

兔環(huán)氧化酶-1(rabbit COX-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

大鼠轉(zhuǎn)酶(ALT)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： ALT ELISA Kit

Mouse alpha mannosidase (alpha Manase) ELISA Kit 小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠雌二醇(mouse E2)  進(jìn)口分裝

CLIAKitfoR(Humankillercellimmnoglobulin-likereceptor)ELISAKit人殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體

通用型單核增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes)試劑盒20次

ELISAKitTGF-β1大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1

重組小鼠白介素-4（無動(dòng)物源）（IL-4）EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原

GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白

GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。