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人膀胱癌細胞；J82運輸在運輸?shù)倪^程中，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要立即打開培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細胞仍不能貼壁，請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理；如若證實細胞無活力，請在收到貨后48小時內(nèi)將細胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。

細胞名稱  人膀胱癌細胞；J82運輸
形態(tài)特性 上皮細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞源自一名58歲患有膀胱移行細胞癌的白人男性。胞內(nèi)無橋粒，有大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及突出絨毛，表達ras基因。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1:2～1:10傳代，每周換液2～3次

傳代情況 P62

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

細胞培養(yǎng)步驟：
一．人膀胱癌細胞；J82運輸培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項：
1.收到人膀胱癌細胞；J82運輸后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
本公司代理ATCC細胞，提供人膀胱癌細胞；J82運輸售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細的說明書或價格信息，點擊了解更多腫瘤細胞。500克Yeast extract酵母浸膏

25克Bile salt No. 33號膽鹽

25克Bile salt No. 55號膽鹽

25克Bile salt No.77號膽鹽

25克Bile salt from sheep羊膽鹽

25克Bile salt from ox牛膽鹽

1公斤

WT-1/Wilms Tumor Protein  腎母細胞瘤蛋白抗體   規(guī)格 0.1ml*

WSTF  轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體   規(guī)格 0.2ml*

WSB2/WD SOCS box protein 2  信號傳導抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2抗體   規(guī)格 0.2ml*

WRCH-1  WRCH1抗體   規(guī)格 0.1ml*

WNT9A  信號通路Wnt9a抗體   規(guī)格 0.1ml*

Wnt8b  WNT蛋白家族Wnt8b抗體   規(guī)格 0.2ml*

Wnt8A  信號通路WNT8A抗體   規(guī)格 0.2ml*

WNT7B  Wnt蛋白家族7B抗體   規(guī)格 0.2ml*

WNT7A  原癌基因wnt7a蛋白抗體   規(guī)格 0.1ml*

Wnt6  信號通路Wnt6抗體   規(guī)格 0.2ml*

WNT5A  信號通路Wnt5a抗體   規(guī)格 0.1ml*

WNT4  信號通路Wnt4抗體   規(guī)格 0.2ml*
人膀胱癌細胞；J82運輸OTOA/DFNB22  耳聾、常染色體隱性遺傳22多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

OTC  氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

OSTM1  骨硬化病相關(guān)跨膜蛋白1多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

Osterix  成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

OST-beta  有機溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白OSTβ多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

OSMR/OSMRB  抑瘤素M受體多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

OSM/Oncostatin M  抑瘤素M多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

OSGIN1  氧化應(yīng)激誘導生長抑制因子1多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

OS9  OS-9蛋白多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

Os05g0477200 protein  水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白多克隆抗體   規(guī)格 1ml*

ORP8  氧化固醇結(jié)合蛋白8多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

ORP4/OSBP2  氧化固醇結(jié)合蛋白4多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*