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紅細胞衍生核因子2樣蛋白2(NFE2L2)ELISA試劑盒洗滌方法:
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)
小鼠噬酸性粒細胞趨化因子(mouse Eotaxin)
小鼠促紅細胞生成素(mouse EPO)
小鼠紅細胞生成素受體(mouse EPOR)
小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(mouse ECP)
小鼠上皮中性粒細胞活化肽-78(mouse ENA-78)
小鼠血管內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin)
小鼠腎上腺素(mouse EPI)
小鼠內(nèi)皮細胞一氧化氮合酶(mouse eNOS)
小鼠雌二醇(mouse E2)
小鼠促卵泡素(mouse FSH)
小鼠凋亡相關因子(mouse Fas)
小鼠凋亡相關因子配體(mouse Fas Ligand)
小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF)
小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2)
小鼠Fibronectin(mouse Fibronectin)
小鼠Flt3(mouse Flt3)
小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand)
小鼠纖維連結(jié)蛋白(mous FN)
小鼠Fractalkine(mouse Fractalkine)
小鼠X(mouse FX)
小鼠纖維蛋白原(mouse Fibrinogen)
小鼠Foxp3(mouse Foxp3)
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)
小鼠胃泌素(mouse Gastrin)
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)
小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1)
小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)
小鼠GRO(mouse GRO)
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞衍化營養(yǎng)因子(mouse GDNF)
小鼠生長因子(mouse GH)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子3(mouse GATA3)
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子4(mouse GATA4)