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如何正確使用GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒?
點(diǎn)擊次數(shù):751 更新時(shí)間:2020-02-25
   如何正確使用GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒?
  GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)的含量。
  操作步驟:
  1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
  24μg/L 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μ1 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
  12μg/L 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
  6μg/L 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
  3μg/L 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
  1.5μg/L 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
  2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
  5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μ1,空白孔除外。GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒
  7.溫育:操作同3。
  8.洗滌:操作同5。
  9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
  10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒
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